紫外可见分光光度计是精密分析仪器，其操作规范性直接影响测量精度、仪器寿命及实验安全。以下从开机前、开机预热、测量过程、关机后、日常维护五个核心维度，梳理详细注意事项：
一、开机前准备：排除环境与硬件隐患
环境检查
温度：需控制在 15~30℃（最佳 20~25℃），避免阳光直射、空调直吹或靠近热源（如电炉），温度剧烈波动会导致基线漂移。
湿度：相对湿度≤ 75%，湿度过高易导致光学部件发霉、电路短路，建议潮湿环境搭配除湿机使用。
清洁：仪器周围无粉尘、腐蚀性气体（如酸碱挥发物），样品室需提前擦拭干净（用无尘布蘸乙醇轻擦）。
电源与配件检查
电源：确认电压为 220V±10%（部分进口仪器需 110V，需提前核对），插头接触良好，接地可靠（避免漏电或电磁干扰）。
光源：检查氘灯（紫外区，190~400nm）、钨灯（可见区，400~1100nm）是否过期（一般氘灯寿命 1000~2000h，钨灯 2000~3000h），外观无发黑、破裂。
比色皿：
材质区分：紫外区（≤400nm）必须用石英比色皿（玻璃会吸收紫外光），可见区（≥400nm）可选用玻璃或石英比色皿，严禁混用。
状态检查：比色皿无裂痕、透光面（两面光滑面）无划痕、污渍，磨砂面（手握面）无破损。
二、开机与预热：保障仪器稳定初始化
开机顺序（严格遵循）
先开启 仪器主机电源，等待仪器自检（屏幕显示 “Pass" 或无报错）；
自检通过后，打开配套软件（如 Shimadzu UVprobe、Thermo Insight），选择对应的光源（紫外 / 可见）；
严禁先开软件再开主机，避免软件无法识别仪器导致通讯故障。
预热要求
光源预热：氘灯需预热 20~30 分钟，钨灯需预热 10~15 分钟，确保光源强度稳定（预热不足会导致吸光度数据波动）。
整机稳定：部分高精度仪器需整机预热 30 分钟以上（具体以说明书为准），预热期间不可打开样品室盖子，避免影响基线稳定性。
三、测量过程：核心操作规范（影响数据准确性）
比色皿使用：避免 “隐形误差"
拿取方式：仅握磨砂面，严禁触碰透光面（指纹、油脂会吸收光，导致吸光度偏高），若不慎触碰，需用无尘纸蘸乙醇轻轻擦拭，再用纯水擦净并晾干。
清洗与润洗：
测量前：比色皿需用纯水清洗 3 次，再用待测样品溶液润洗 2~3 次（避免样品浓度被残留水稀释，导致数据偏低）。
测量后：若样品为酸、碱、有机溶剂（如甲醇、乙醇），需立即用对应溶剂冲洗（酸 / 碱用大量水冲，有机溶剂用乙醇冲），再用纯水洗净，倒置晾干（避免残留腐蚀比色皿）。
装液要求：液体体积需占比色皿 2/3~3/4（过少会导致光路未被覆盖，过多易溢出污染样品室），装液后需轻轻倒置摇匀（避免气泡），若有气泡需用针头挑破或静置至气泡消失（气泡会散射光，导致吸光度异常偏高）。
空白校正：消除背景干扰
空白溶液选择：需与样品 “基体一致"（如样品为水溶液 + 试剂，空白则为纯水 + 同等浓度试剂），不可直接用纯水做空白（会忽略试剂本身的吸光度）。
校正操作：将空白比色皿放入样品室的 “参比位"（一般为第一个卡槽），样品比色皿放入 “测量位"，点击软件 “空白校正" 或 “基线校正"，待校正完成（吸光度显示 0.0000±0.0005）后再开始测量。
注意：每更换一次波长，需重新进行空白校正（不同波长下，空白的吸光度可能不同）。
样品测量：控制浓度与操作细节
浓度范围：样品吸光度需控制在 0.2~0.8（部分仪器 0.1~1.0），此范围线性关系最佳；若吸光度＞1.0，需用溶剂稀释（记录稀释倍数，最终结果 = 测量值 × 稀释倍数）；若吸光度＜0.2，需浓缩样品（避免误差过大）。
光路对齐：比色皿放入样品室时，需确保透光面与光路方向一致（部分比色皿有箭头标识），盖紧样品室盖子（开盖会导致杂光进入，数据跳变）。
测量顺序：建议从低浓度到高浓度测量（避免高浓度样品残留污染低浓度样品，若污染需用空白溶液冲洗比色皿 3 次后再测）。
数据记录：避免遗漏关键信息
记录内容：波长、空白溶液组成、样品稀释倍数、吸光度值（保留 4 位有效数字）、测量时间、仪器型号；
数据验证：同一样品平行测量 3 次，相对标准偏差（RSD）需＜2%（精密实验＜1%），若 RSD 过大，需检查比色皿是否洁净、样品是否均匀。
四、关机后操作：保护仪器与环境
关机顺序（反向开机）
先关闭软件（保存数据后正常退出，避免强制关闭导致数据丢失）；
等待软件关闭后，关闭仪器主机电源；
最后拔掉插头（长期不用时），若短期使用（如次日再用），可保留插头，但需关闭主机电源。
样品室与比色皿清理
样品室：用无尘布蘸纯水擦拭残留液体（若样品为腐蚀性物质，需用对应中和剂擦拭后再用纯水擦净），保持干燥；
比色皿：洗净后倒置在比色皿架上晾干，严禁用滤纸擦拭透光面（会产生划痕），长期不用时需放入干燥器（加硅胶干燥剂）。
周边环境整理
清理实验台，避免样品、试剂靠近仪器；
记录仪器使用日志（如开机时间、预热时长、测量样品数、是否出现故障），便于后续维护排查。
五、日常维护与校准：延长仪器寿命
定期维护（按说明书周期）
光源更换：氘灯、钨灯达到寿命后需及时更换（灯能量不足会导致基线噪声增大），更换时需断电操作，避免触碰灯的石英外壳（指纹会影响寿命）；
光学部件清洁：每 3~6 个月，用洗耳球吹去单色器、检测器表面的粉尘（严禁拆开仪器外壳，需由专业人员操作）；
比色皿维护：定期检查透光面，若有划痕需更换（划痕会导致吸光度偏高），避免用硬物（如试管刷）清洗。
定期校准（确保精度）
波长校准：每 6~12 个月用标准波长溶液（如重铬酸钾溶液、钬玻璃滤光片）校准，若波长偏差＞2nm，需由专业人员调整；
吸光度校准：用标准吸光度溶液（如高锰酸钾溶液、硫酸铜溶液）校准，确保测量值与标准值的误差＜1%；
基线平直度检查：在空白校正后，扫描全波长（190~1100nm），基线漂移需＜0.001A/h（200nm 处）、＜0.0005A/h（500nm 处），若漂移过大，需检查光源或光学部件。
特殊情况处理
仪器报错：若显示 “光源错误"“通讯故障"，先断电重启，若仍报错，联系厂家售后（严禁私自拆修）；
样品溢出：若样品洒入样品室，立即断电，用无尘布吸干液体，再用对应溶剂（如乙醇、纯水）擦拭，晾干后再开机（避免电路短路）；
长期闲置：每月开机预热 1 次（30 分钟），防止光学部件发霉、电池亏电（部分仪器有内置电池）。
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